LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA II I. NOMOR PERCOBAAN : I (SATU) II. NAMA PERCOBAAN : Sterilisasi Media dan Kultivasi Mikroba III. TUJUAN PERCOBAAN : 3.1 Pembuatan Media 3.2 Sterilisasi Media 3.3 Inokulasi dan Kultivasi Bakteri IV. TINJAUAN PUSTAKA • Mikroba/mikroorganisme • Media pertumbuhan bakteri • Metode sterilisasi • Metode isolasi/inokulasi/kultivasi bakteri • dll (yang masih berhubungan dengan percobaan 1) Catatan: • Pilih beberapa poin di atas untuk menyusun tinjauan pustaka (minimal 2 paragraf); • Pastikan setiap paragraf membahas topik/poin yang berbeda; • Kalimat wajib diparafrase; • Pastikan 1 buku/jurnal Indonesia (terindeks Sinta) dan 1 jurnal internasional (terindeks Scopus); dan • Jika menuliskan nama genus dan spesies, maka wajib digaris bawahi, misal: Staphylococcus / Staphylococcus aureus.
V. ALAT DAN BAHAN 5.1 Alat a. Aluminium foil b. Autoklaf c. Bunsen d. Cawan petri e. Erlenmeyer 50 mL f. Gelas piala 50 mL g. Gelas ukur 10 mL h. Hotplate i. Jarum ose j. Kapas k. Magnetic stirrer l. Neraca analitik m. Plastik wrap n. Spatula o. Tabung reaksi 5.2 Alat a. Akuades (H2O) b. Nutrient agar (NA; agar nutrien) c. Stok bakteri Staphylococcus aureus
VI. PROSEDUR PERCOBAAN 6.1 Sterilisasi Alat Alat (cawan petri, gelas ukur 10 mL, jarum ose, tabung reaksi) - dibungkus dengan kertas dan diikat dengan karet - disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit Alat steril
6.2 Pembuatan Media - dimasukkan ke dalam gelas piala 50 mL - dilarutkan dengan akuades 27 mL - dimasukkan ke dalam erlenmeyer 50 mL - dipanaskan menggunakan hotplate pada suhu 100oC - dihomogenkan menggunakan magnetic stirrer Media NA - disumbat mulut erlenmeyer dengan kapas dan ditutup dengan aluminium foil - disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit Media NA steril 20 mL Media NA Steril 7 mL Media NA Steril - dituangkan ke dalam cawan petri - didiamkan dalam keadaan tertutup hingga media dingin dan padat - dituangkan ke dalam tabung reaksi - didiamkan dalam keadaan tertutup dan miring hingga media dingin dan padat Media NA datar Media NA miring 0,54 g Nutrient Agar (NA)
6.3 Inokulasi Media Kultur Stok Bakteri Staphylococcus aureus - diambil menggunakan jarum ose yang telah disterilkan dan dipanaskan - digoreskan pada permukaan media agar datar dan miring dengan gerakan zig-zag - difiksasi bibir cawan petri dan tabung reaksi secara singkat di dekat api bunsen - ditutup media yang telah digores, kemudian dibalut dengan plastik wrap dan dibungkus dengan kertas serta diikat dengan karet - diinkubasi media di dalam inkubator pada suhu 37oC selama 24 jam dengan posisi cawan petri diletakkan terbalik Subkultur Bakteri Staphylococcus aureus
VII. DATA HASIL PENGAMATAN Media Pertumbuhan Gambar Datar • Terjadi/tidak terjadi pertumbuhan bakteri. • Terdapat/tidak terdapat kontaminan. Format dan rasio gambar harus diseragamkan dalam satu kelompok Miring • Terjadi/tidak terjadi pertumbuhan bakteri. • Terdapat/tidak terdapat kontaminan. Format dan rasio gambar harus diseragamkan dalam satu kelompok
